人工养蛇时，雄蛇与雌蛇应分开饲养，到繁殖交配季节时再把雄蛇放人雌蛇群中，1条雄蛇一般可与10条雌蛇交配。交配后又分开饲养。王锦蛇的繁殖方式为卵生，雌E锦蛇一般在6月底至7月中旬为产卵高峰期，每次产卵8～12枚，多达20枚，其卵呈长圆形，重40～45克。1条雌蛇交配1次后，精子在母蛇体内可以存活多年。蛇卵的孵化期为40～45天。王锦蛇受精卵人工孵化方法同其他蛇卵大多数采用缸孵法或木桶在室内孵化。
孵化的较好温度为20～30℃。孵化缸内的孵化温度应控制在24～27℃，相对湿度为50％～70％，在此温、湿度范围内孵化出的雌、雄幼蛇几乎各占一半；若温度在20～24℃，相对湿度在90％，则孵出的几乎都是雄蛇，故应控制孵化缸内适宜的温、湿度。每个孵化缸内都应吊放一支温度表和湿度表。若湿度高时，可在卵上放些新鲜树叶或鲜草，2天更换1次。温度过低而湿度过高时，需及时打开缸盖，悬吊一只60～80℃的热水袋于卵上，切忌接触到卯。刚出壳的仔蛇体长25～35厘米，体色较浅，头部前鳞片无“王”字形斑纹。刚出壳仔蛇不需投饵，出壳7天后人工诱导开食，同时要加强对仔蛇的护养。
