新鲜蛇毒是一种成分复杂的混合性胶状液体,主要成分为多种酶、毒素、多肽和无 机物等,比较粘稠,带有一定腥味,透明或半透明,放在试管里呈油状颜色或淡乳黄色、 灰白色。含水量不等,约75%左右。一般在室温下放置24h即可腐败,发臭变质,液体 混浊或沉淀。尤其在盛夏变质更快,故蛇毒取出后应立即放入冰瓶或冰箱内暂存。冰箱 (桶)内冰块18h〜24h更换1次,可保存2天〜3天,便于野外取毒携带。新鲜蛇毒在冰 箱内冷冻情况下可以保存2周〜4周,如果时间再长,则毒力降低。经过彻底脱水干燥后 的蛇毒,如果保存较好可以存放20年以上,因此鲜毒取出后应尽快进行干燥处理。
蛇毒是一种胶状液体,并且含有多种蛋白酶,经日晒或高温均可使其变质。蛇毒中 的水分不易蒸发出来,而干燥好坏对蛇毒质量的影响极大,为了获得较高质量的蛇毒,只 有让液体蛇毒尽快地变成固体,并且在干燥过程中不丧失其活性。目前所采用的方法有 两种:一是常温下真空干燥,一是冷冻真空干燥。经这样处理的干毒为粗毒。如为了合 理应用,去除杂质,经过柱层析或电泳等方法把蛇毒中的不同成分分开,获得更高级的 蛇毒不同组分,称为精毒。
下面仅对粗毒加工予以介绍。
(一)常温真空干燥法
器材准备:30L/min〜60L/min旋片式真空泵1台,导管1. 5m〜2m,220mm〜 300mm 口径真空干燥器1只,盛毒皿数个(坩锅、瓷碗、烧杯均可),千燥剂五氧化二磷、 氯化钙或矽胶适量。五氧化二鱗为白色粉末状,吸湿性很强,作用快,可以使蛇毒干燥 后含水量在4%以下,但吸湿后易结痂,吸湿力减退,不易挖出。五氧化二磷吸水后转化 为偏磷酸,具有腐蚀性。氯化钙为白色粉块状物,吸湿力中等,可使蛇毒含水降到3%〜 6%。吸水后容易清出,并可经烘干后再生应用,且价钱便宜,但干燥不如五氧化二磷彻 底。矽胶为变色颗粒状物,无水时蓝色,吸水后为粉红色,故称变色矽胶,吸湿力中等。 矽胶颜色变成粉红色为吸水已饱和,不能使用,但经150°C〜200°C烘干后可再生,价钱 比较便宜,不粘器皿。一个干燥器只能用一种干燥剂,以上干燥剂酌情选用。
操作方法:工作人员操作时应事先戴好口罩、手套、眼镜,然后用硬胶管连接真空 泵与真空器封口及抽气活塞处并涂以真空封油(可用凡士林代替),然后关闭。打开活塞, 使抽气乳头与活塞排气道重合,接通电源,抽吸lmin〜2min,检查真空器密封是否良好。 如密封良好,关闭活塞,切断电源,拔掉胶管,打开活塞放进空气,再平行移动打开真 空器,在载物盘下面放入2/3量的干燥剂,放好载物盘,并在其上铺一层纱布,防止抽 吸时干燥剂粉末污染蛇毒。再将盛有鲜毒的坩锅、培养皿等移入干燥器内放平,每个盛 毒皿只能装0. 3cm〜0. 5cm厚,不可过多,以防止抽真空后外溢。每个干燥器同时只能干 燥一种蛇毒,不可混放。再如上述操作方法开始抽吸,达到接近真空为止。判断方法是 蛇毒已起泡,且泡已连片接近覆盖蛇毒表面。此时首先关闭活塞,然后再切断电源,注 意千万不可先关电源,后关活塞,写的是防止因真空器内负压较大,通过管道将真空泵 内的油吸入,污染蛇毒而报废,此类教训很多。观察15min〜30min,待蛇毒表面气泡已 逐渐减少,再接通电源,打开活塞反复进行数次,不可一直抽气,免得由于蛇毒蒸发后 粘稠气泡过多而溢出或崩出盛毒皿,造成损失。待蛇毒表面已结痂,不会溢出后,可连 续抽吸lh〜2h,关闭活塞,切断电源封闭24h,待彻底干燥后取出。干燥比较彻底的蛇 毒松脆易碎,粉末无结晶、亮光。不同蛇种的蛇毒颜色不同,呈金黄色或白色。如蛇毒 量较少,真空器较大,干燥剂又多,可直接抽吸达到真空后停机,让其自行干燥。注意 干燥剂应该适时更换或添加,如干燥剂已失效,会降低干燥速度,影响质量。
(二)冷冻真空干燥法
该方法干燥出的蛇毒质量好,特别是采用大型真空冷冻干燥机所干燥的质量更好。目 前常用的有比较简单的一般冰冻真空干燥法及特殊的冷冻真空干燥法。
一般冰冷真空干燥法即在常温真空干燥装置基础上,使干燥器下半部周围置于 特制的盛有冰的桶内或制冷装置内,冰块与干燥器之间不能直接接触,因为干燥器为玻 璃制品,在干燥时干燥剂吸水后产生一定热量,如直接与冰块等接触,受冷不均容易使 干燥器炸裂。这样整个操作过程都在低温下进行。还有一种简单方法就是把新鲜毒液放 入冰箱内冷冻后再放入常温真空干燥器内干燥。优点是简便易行,降低鲜毒在常温下停 留的时间,干燥后的蛇毒较疏松,较单纯常温为好。
冷冻真空干燥机干燥法这种设备比较精密,造价较高,小型真空冷冻干燥机采 用干冰(固体二氧化碳)。大型真空冷冻干燥机容积较大,开动一次费用较高,而且每次 干燥蛇毒的量并不多,因此不易采用。但用这种方法干燥的蛇毒质量较好,质地疏松,如 奶粉状,含水量也低,可以达到3%以下,并且易溶解;在干燥过程中酶活性不丧失,也 不易发生在干燥过程中蛇毒外溢的情况。