蛇毒质量的检测与蛇毒的鉴别

蛇毒质量的检测主要是鉴定同种蛇毒的优劣，蛇毒的鉴别是区分不同种类的蛇毒及 其真伪，掌握蛇毒的测定及鉴别是对蛇毒研究的最基本要求。每种蛇毒都有其特定性质， 我们可以根据此关系来区分不同蛇种的蛇毒。以某种标准蛇毒测定的标准为依据，来判 定某种蛇毒质量的优劣。常用一般标准如下：

(―)毒性强度

一般毒性测定分为急性、亚急性和慢性毒性三种。蛇毒的毒性强度只需要测定急性 毒性，用来表示其杀伤力、中毒反应力。毒性强度大，杀伤力就强；反之就小。一般用 小白鼠半数致死量LD5。来表示，也有用小白鼠全致死量LD1Q。表示的，能使95%〜100% 小白鼠死亡的量为MLD。其测定方法为选用某种给毒途径（皮下、腹腔、静脉注射），按 每千克体重计算给毒量，注入体内后，在一定时间内可引起半数动物死亡的剂量称为 LD5。。其数值通过统计学公式处理，根据LD5。值的大小判定毒性强弱。数值越小，毒性 越强；数值越大，毒性越小。经过测定，国内10种毒蛇蛇毒的大致强度如表2-9-2。

表2-9-2我国10种毒蛇蛇毒的大致强度

关于蛇毒毒性强度的实验数据各地报道很多，并且差异也颇大。实验数据受多种因 素的影响，如地区不同、同种蛇产地不同，其毒性可能不一样；蛇毒的处理情况、采毒 季节、饲养条件、保存时间长短、保存方法等均可影响毒性。但是上表基本可以反映出 不同蛇种蛇毒的强度。银环蛇毒毒力最强，五步蛇毒毒力最弱。给药途径不同，LD5。的值 也不一样。其顺序为腹腔给毒最小，静脉次之，肌肉更次，皮下较大。

(二）蛇毒的质量测定

蛇毒的质量测定，目的是检验蛇毒的种类、合格程度。一般常检测以下数项：性状、 气味、色泽、含水量、蛋白质总含量、不溶物质、光谱密度（吸收较大峰值）、毒性强度 等。为了鉴定何种蛇毒可采用免疫扩散，测定其特殊成分等。

蛇毒处理检查由于各种蛇毒内的化学成分各不相同，因此干燥后的蛇毒也有所 不同。一般干燥彻底的蛇毒松脆易碎，无硬块，重量轻，呈细颗粒或粉末状，有一定挥 发刺激性气味。五步蛇毒、蝰蛇毒呈白色，银环蛇毒呈灰白色，竹叶青蛇毒呈浅黄绿色， 蝮蛇毒、眼镜蛇毒呈浅黄到黄色，眼镜王蛇毒、金环蛇毒、烙铁头蛇毒为金黄色。如干 燥不彻底或混有杂质较多则有色泽的改变，并且颗粒较粗大，表面发亮不易碎，溶解慢 或不彻底，往往粘附于试管壁上。主要原因是抽气时间短，负压不足，表面干燥而内部 干燥较差。

含水量测定清洁干燥的称量瓶要再置于l05°C烘箱内5min〜lOmin，然后用坩 锅钳将称量瓶取出，放入干燥器内冷却并称重，加上样品500mg (被测的蛇毒）后再放 于105°C烘箱内2h后称蛇毒重量。烘干后的蛇毒要立即加盖，整个操作过程不得用手直 接去拿。正常干毒含水量应在5%以下，允许值不超过7%。

溶解度测定主要检査不溶物质的含量。不溶物质含量越少越好，一般不应超过0. 8%蛋白质测定蛇毒成分主要为多种蛋白质和多肽的混合物，此外还含有少量的脂 质、磷脂和单糖、无机盐、钾、钠、锌等，但蛋白质及多肽的总含量占85%〜90%。蛋 白质含量的测定多采用紫外分光光度计分析，蛇毒蛋白吸收较大峰值在279nm〜283nm 之间。

电泳或柱层析不同种类蛇毒含有不同的蛋白质成分，因此表现电泳带及柱层析 各组分含量也不一致，是区别不同类蛇毒的主要方法。

免疫电泳扩散法把电泳技术同免疫扩散结合起来，用已知的抗体（某种抗蛇毒 血清）来检测未知的抗原（蛇毒）。如属同一蛇种蛇毒，可在相接部位产生明显的沉淀线 反应，用来区别不同种类蛇毒。