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蛇毒 酶学性质

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   2015-04-06 1310
核心提示:从C.蛇毒中分离的L-氨基酸氧化酶水解L-亮氨酸的最适pH为7.5,但不同底物最适pH不同,在pH7.5时该酶不能氧化赖氨酸和鸟氨酸,在PH9.4时则该底物很容易被氧化。L-氨基酸氧化酶对各种氨基酸的反应

从C. 蛇毒中分离的L-氨基酸氧化酶水解L-亮氨酸的最适pH为7. 5,但不同底物最适pH不同,在pH7. 5时该酶不能氧化赖氨酸和鸟氨酸,在PH9. 4时则该底 物很容易被氧化。L-氨基酸氧化酶对各种氨基酸的反应速度是不同的,一般地说氨基酸 的链越长,对酶越敏感。除碳原子外,对其他原子的构型没有要求,例如L-异亮氨酸和 别异亮氨酸对酶都很敏感。对从 蛇毒中分离的L-氨基酸氧化酶而言,其最

适的氨基酸为亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸和甲硫氨酸。它的酶活性能被苯甲酸、水 杨酸、偏磷酸和碘乙酸强烈抑制。由于蛇毒中L-氨基酸氧化酶的含量高且易提取,实验室 广泛用于各种纯酮酸的生产,也可以用于由3,5-二碘酪氨酸生产甲状腺素以及用于氨 基酸光学异构体的鉴别。

Zeller等(1965)对从C1. 蛇毒中分离的L-氣基酸氧化酶Km值进行了测

定:以L-亮氨酸为底物Km为14. 3mm0l/L;以苯丙氨酸为底物Km为1. 8mm0l/L;以色 氨酸为底物Km为3. 8mmol/L。对L-苯丙氨酸反应的较大速度不受加入20mmol/LD-苯 丙氨酸的影响。蛇毒中的L-氨基酸氧化酶对许多含硫的氨基酸有作用,但对其亚砜的衍 生物,S-腺苷-L-甲硫氨酸、磺基丙氨酸、同型磺基丙氨酸、羊毛硫氨酸和胱硫醚没有作用。 在PH7.5时对下列各种底物的亲和力顺序为:L-甲硫氨酸(Km = 0.35mm0l/L),L-同型 胱氨酸(0. 72mmol/L),L-同型半胱氨酸(1. 3mmol/L),S-腺苷-L-同型半胱氨酸 (1. 9mmol/L),S-核苷-L-同型半胱氨酸(2. 2mmol/L),L-亚甲胱氨酸(3. lmmol/L),半 胱氨酸(4. 5mmol/L)和L-胱氨酸(5. Ommol/L)。高浓度的底物可以抑制L-氨基酸氧化 酶的活性,抑制的程度与氧的压力有关,在常压下PH7. 5时,高于5Xl(T3m0l/L的L-亮 氨酸可以抑制该酶的活性,而在同样条件下缬氨酸在0. 3mol/L时也不能抑制其活性。

我国学者对L-氨基酸氧化酶的研究不多,只有少量有关该酶的报道。云南省昆明动 物研究所第四研究室对湖南产眼镜蛇毒 进行了柱层析分离并对毒性组分

和酶活力进行了测定,发现峰3、峰4和峰5具有L-氨基酸氧化酶的活性。张洪基(1980) 对尖吻蝮蛇毒进行了分离,也发现粗毒含有L-氨基酸氧化酶活性。

Zeller(1948,1951)报道蛇毒L-氨基酸氧化酶能够激活组织中的肽酶和蛋白水解酶, 但对这种结果有人持怀疑态度。对L-氨基酸氧化酶的生理作用进行研究,证明从V. am- 蛇毒中分离的L-氨基酸氧化酶不能激活人血清亮氨酸氨肽酶,他还发现家兔的 动脉血压不受该酶的影响,但能引起组织坏死。从C. adamawtoa蛇毒中分离的L-氨基酸 氧化酶对白鼠的半数致死剂量为9. 13mg/kg,几乎达到粗毒毒性的50%,但由于该酶在 粗毒中含量只有1%,所以L-氨基酸氧化酶对毒性的影响还是比较小的。Russell发现这 种酶不会影响神经、肌肉和神经肌肉传导。Yang等(1959)发现眼镜蛇舟山亚种(W. m声 afra)中的L-氨基酸氧化酶和神经毒性无关,所以认为该酶对毒性的影响不大。总的来说, 蛇毒L-氨基酸氧化酶的生理作用不太清楚,有待于进一步研究。

有关蛇毒中乳酸脱氢酶知道得很少。较先由Mclean等(1971)报道,他们发现下列蛇 的蛇毒可以催化乳酸转变成丙酮酸:眼镜蛇 、眼镜蛇舟山亚种 、

黑颈眼镜蛇 、黑唇曼巴 、金黄眼镜蛇 、埃及眼 镜蛇 、曼巴 、黑曼巴 . 掠网澳蛇  。吴祥提等(1985)报道,在眼镜王蛇 、尖吻蝮蛇 和青环海蛇 蛇毒中也存在这种酶。由于这种酶的生物学功能和应用不十分重要,到目前为止还没有见纯化这种酶的报道。

 

 
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