对蝮亚科毒蛇咬伤 的早期症状研究表明，动物血压下降 是主要症状之一，但所用的实验材料 是粗毒。蝮亚科蛇毒中丰富的酶类及 毒性组分使得阐明其降血压机制十分 困难，因此必须首先获得能引起降压 的纯组分。王玉珍等从尖吻蝮蛇毒中 分离出一种纯的降压组分。经测定该 组分无蛋白水解酶活性，无pla2活 性，无精氨酸酯酶活性，也没有舒缓激 狀释放酶、碱性磷酸单酯酸和5'-核 昔酸酶活性。在生理活性方面也没有 出血、溶血和纤溶活性。纯化方法如 下：
DEAE-Sephadex A-50 柱层析 粗毒 3g 溶于 30ml 0. lmol/L pH8. 0 Tris-HCl缓冲液中，离心5min， 取上清液加于柱上（4cm X 80cm)，洗 脱曲线见图3-13-23A。用测兔动脉血 压的方法检测，峰5有明显降压作用， 将此峰收集冻干，约有200mg，每批 分离略有差异。
Sephadex G-75柱层析将上 步得到的峰5浓缩液上Sephadex G- 75柱（3cmX 100cm)平衡洗脱液为
15mol/L NaCl，结果见图 3-13- 23B。峰2具有降压活性，将其脱盐冻 干得50mg,各次结果略有差异。
CM-Sephadex C-25 柱层析 将上步所得峰2组分对醋酸钠缓冲液 (pH6. 5)透析平衡后上柱（1.5cmX 40cm),洗脱过程见图3-13-23C,峰1 为降压组分，脱盐冻干得25mg，活性 纯化倍数为5倍。
神经生长因子（NGF)是一类感觉和 交感神经元生长、发育必需的因子。An- geletti等从印度眼镜蛇毒中分离、纯化了 NGF并且测定了这种NGF的氨基酸组成 及部分顺序。Server等比较了印度眼镜蛇 毒NGF与小鼠颌下腺NGF的结构和功 能。蛇毒中的NGF纯化因不同蛇毒而不 同，这里介绍雷少波等人从中华眼镜蛇毒 中纯化NGF的方法。
Sephadex G-50柱层析眼镜蛇粗 毒3g溶于10ml 1%乙酸溶液中。经3 000r/min离心lOmin，上清液上样于45cm X 128cm柱。用1%乙酸洗脱，流速32ml/ h，8ml/管分部收集。洗脱液在280nm波长 测光吸收值，如图3-13-24所示。
CM-Cellulose 32 柱层析取上一 步层析中的活性组分276mg溶于5ml05mol/L乙酸钠缓冲液（PH5. 0)中，离 心后上样于2. OcmX 89cm柱。先用起始缓 冲液洗脱，再用0mol/L〜1. Omol/L NaCl 凸型梯度洗脱。流速60ml/h，10ml/管分部 收集。如图3-13-25所示，可分出3个峰。 将各峰分别收集，透析除盐后冷冻干燥。第 2峰具有NGF生物活性。
Sephai:ose6B柱层析取第二步中 的NGF组分约49. 8mg加入2. 0ml 0. 05 mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5)中。离心后 上样于2. 5cmX 160cm柱，用同种缓冲液 洗脱，流速为18ml/h，6ml/管分部收集。 如图3-13-26所示，可分出2个峰。将各峰 分别收集，透析除盐后冷冻干燥， 第1峰具 有NGF生物学活性，得到NGF纯品约 12mg。
