推广 热搜:

蛇毒舒缓激肽增强肽的分离纯化

中国较大的养蛇合作社?    
   2015-04-06 1770
核心提示:蛇毒中舒缓激肽增强肽(Bradykinin potentiating peptide简称BPP)是含5个〜13个 氨基酸残基的活性短肽,已有很多文献报道。BPP对血管紧张素I转化酶有很强的抑制 作用。BPP既能抑制激肽酶I增加舒缓激肽的作用,又能抑制血管紧张素I转化酶,使体 内不致产生有加压作用的血管紧张素I,是一种有效的降压物质。

蛇毒中舒缓激肽增强肽(Bradykinin potentiating peptide简称BPP)是含513 氨基酸残基的活性短肽,已有很多文献报道。BPP对血管紧张素I转化酶有很强的抑制 作用。BPP既能抑制激肽酶I增加舒缓激肽的作用,又能抑制血管紧张素I转化酶,使体 内不致产生有加压作用的血管紧张素I,是一种有效的降压物质。现已人工合成了一种更 简单有效的BPP类似物一甲巯丙脯酸(2-甲基-3-巯基丙酰脯氨酸),广泛应用于临床治 疗肾性高血压。

1965Ferreira在美洲 矛头複jararaca ) 毒中首先发现了能在体内外增 加舒缓激肽作用的BPP因子, 并先后阐明9BPP因子的 结构。其后不久,Kato等也从 日本蝮蛇亚种蛇毒中分离得到BPP组分,并测定了结构。 在我国,1981年上海生化所何 子安等(1981)从浙江蝮蛇亚种蛇毒中纯化了一种BPP组分,并 阐明了它的结构。以后王茂音 等(1983)又对浙江蝮蛇亚种蛇 毒中的BPP进行了深入的研 究,发现共有3BPP存在。

魏珊等(1988)从江西蝮蛇毒中 纯化出了 3BPP组分,分别 9肽、10肽和16肽,这里介 绍他们的分离方法。

用乙醇粗提蛇毒取蛇 毒冷冻干粉l0g,溶于1 000ml 蒸馏水中,在沸水浴中煮沸 lOmin,冷却后加95%乙醇 (500ml/g粗毒),将乙醇混悬液 过滤,上清液在旋转蒸发仪上浓 缩至干。将减压抽干的粉末再用 无水乙醇提取3次,每次20ml合并提取液浓缩至干。

Sephadex G-15柱层析将上述乙醇提取得到的干粉溶于2ml 0. 02mol/L NH4HC03 缓冲液中,直接加至丨J Sephdex G-15 层析柱(1. 7cmX170cm)中,用 0. 02mol/L pH8. 0 NH4HC03缓冲液进行洗脱

3.SE-SephadexC-25层析将上述活力峰合并收集,用蒸馏水稀释一倍,并用甲酸  pH  2. 5 左右。上 SP-Sephadex C-25 层析柱(1. lcmX30cm),用 0. 01mol/L pH2. 5 甲酸铵梯度洗脱(100ml),见图3-13-50

Sephadex G-10柱层析将三步分离后的活力峰收集并浓缩,加到Sephadex G- 10(1. 0cmX 110cm)上脱盐,用O.lmol/LpHl.O的盐酸洗脱,见图3-13-51。收集活力峰用奈氏试剂检査确定不含NH4+后,浓缩以备检测纯度用。

 
反对 0举报 0 收藏 0 打赏 0评论 0
 
更多>同类养蛇技术
推荐图文
推荐养蛇技术
点击排行
网站首页  |  使用协议  |  版权隐私  |  关于我们  |  联系方式  |  网站地图  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报  |  湘ICP备15013970号-11