蛇毒的抗凝组分的研究均不甚深入。眼镜蛇科的蛇毒中有些抗凝组分主要是由于它 们的抗凝血酶原激酶的作用，如眼镜王蛇和黑颈眼镜蛇的蛇毒都能显著地干扰凝血酶原 激酶的生成。某些蝰亚科和蝮亚科的蛇毒也有相似的抗凝血活性，即具有抑制凝血酶原激 酶的作用，尖吻蝮、棕点竹叶青和浙江蝮蛇的蛇毒都有这种组分。
尖吻蝮蛇毒的抗凝组分对家兔血液凝固的体内作用，能引起一个明显但是短暂的全 血凝固时间延长和一阶段凝血酶原时间的延长。而对二阶段凝血酶原水平及血浆纤维蛋 白原水平却无明显改变，所以推测血液凝固时间的延长是由于影响了凝血酶原激酶的生 成。
蛇毒中抗凝组分的鉴定，同样可以采用体外试管法，测定凝血时间（正常值为10士 2min)或血浆复钙时间(正常值为1. 5min〜3min)。如蛇毒中有抗凝组分存在，则无论凝血 时间或血浆复钙时间都会有明显的延长。
蛇毒的促凝作用或抗凝作用，在有些蛇毒可能是多种组分中的一种组分的作用，但多 数蛇毒是几种组分综合的作用。再有如绝大多数蝰科蛇毒和大多数响尾蛇科蛇毒，以及某 些眼镜蛇科蛇毒中可同时含有促凝及抗凝两种组分。所以，蛇毒对血液凝固的整个作用显 得很复杂。蛇毒组分的作用可以表现为单个或复合的促凝作用，或者单个或复合的抗凝作 用。有时还表现为促凝组分和抗凝组分的综合作用。因此，除了极少数眼镜蛇毒仅有促凝 作用和有些科的蛇毒较多的仅有抗凝作用外，有相当一部分蛇毒不可能把它们分为促凝 或者抗凝的哪一种，也有少数蛇毒对血液系统既不促凝也不抗凝。
有些蛇毒对血液凝固系统的作用错综复杂，由于各个研究者的实验方法不同有时会 出现互相矛盾的报告，也是不足为奇的。
纤溶组分能够激活纤溶酶原，也能增加链激酶对纤溶酶原的激活作用。这类纤溶组分 可以在蝰亚科的蛇毒中找到。
蝮亚科的尖吻蝮、棕点竹叶青和浙江产蝮蛇毒中的纤溶组分则不同，其作用是直接溶 解纤维蛋白，即和纤溶酶的作用相同。尖吻蝮的纤溶组分同时具有出血毒活性。用EDTA等即能完全抑制其纤溶活性，也能抑制其出血毒活性，说明这种组分是一个“金属蛋白组 分”，也说明其纤溶活性与出血活性是紧密相关的。浙江产蝮蛇毒的纤溶组分略有不同，它 没有明显的出血毒活力，也没有溶血作用。
蛇毒中纤溶组分的鉴定可以用纤维蛋白平板法测定。在凝结好的纤维蛋白平板上，放 一定量的待检样品，经37°C保温18h，可测定圆形溶解孔的大小。溶解孔面积的大小与纤 溶活性成正比。
纤维蛋白被纤溶活性组分作用后生成纤维蛋白降解产物(FDP)，所以动物实验还可 以通过FDP的测定来测定纤溶活性。通常临床检验可采用副凝试验、免疫学检查或致敏 红细胞凝集抑制反应来测定，如有纤溶组分存在，则FDP会有较明显的增加。
(一） 纤溶组分的测定
检测方法(Astrup等，1952):
用咪唑盐缓冲液(pH7.4,0. 05mol/L咪唑缓冲液与0.85%氯化钠以1 : 9的体积比 混合配制）配制的纤维蛋白原溶液(0. 2%)l0ml分别置于每个陪替氏培养皿中，放在水平 位置上。然后用一个微量吸管取0. 2ml凝血酶(每lml含100IU)加在平板上，使其凝固， 在轻微摇晃5s后，形成凝板。每板精确加入0. 025ml检测液，然后在WC保温20h，测量 溶解带。酶活性以垂直两个方向的直径毫米数表示。在各次试验中，每个样品都平行做三 次，然后取平均值。
(二） 纤维蛋白原溶解组分的测定
方法一（Ware 等，1947)
纤维蛋白原溶液(20mg/ml)和一定浓度的待测溶液(用pH7. 4咪唑盐缓冲液配)分别在 37 °C预热3min。将一定体积的待测溶液加入到等量的纤维蛋白原溶液中，记录反应时间，在不 同时间内取一定体积(0. 2ml或0. 5ml)放入装有30ml咪唑盐缓冲液的50ml试管中，混匀。 向试管中加入保温的凝血酶溶液（每lml含100IU)0. lml，混匀，室温下放置30min，在1 500r/mm的速度下离心20min。如有纤维蛋白凝块，把纤维蛋白凝块小心地用玻棒取出，滤纸 吸干后用盐水洗涤。洗涤后的凝块放入含有1. 0ml 10% NaOH试管中，煮沸30min，加入 5ml水、3ml 20% Na2C03和1. 0ml酿试剂，混勻。维持20min后，用分光光度计在540nm处 测量光吸收,按照酪氨酸标准曲线，就能确定可凝固的纤维蛋白原。
方法二(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）
该法主要定性的确定待测样品对纤维蛋白原的水解情况以及对纤维蛋白原 链的水解难易程度。
纤维蛋白原（20mg/ml)和样品（0. lmg/ml)溶于0. 03mol/L pH7. 4的醋酸铵缓冲液 中并保温，在不同的时间间隔取l00W反应液作如下处理:先溶于1004内含4%SDS、 10% P-疏基乙醇和0. 5mol/L EDTA的溶液中，然后在37°C下保温2h。处理后的样品进 行SDS-PAGE。电泳胶为5%，其他条件和测分子量的SDS-PAGE相同。不加酶液的纤维 蛋白原对照显出3条带，分别为链，其他经酶作用的电泳图和对照比较就能确定 该酶对纤维蛋白原是否有作用，对其中的哪条链最敏感。
(三） 抑制血凝块收缩的测定
蛇毒的有些血小板功能抑制因子能抑制血凝块的收缩，测定方法如下：
兔血小板丰富血浆0. 6ml和0. 3ml的抑制因子混合，对照组中用PBS代替抑制因 子。混合后的溶液放在没有盖子的试管中，在371：保温3min以后，加0. lml的牛凝血酶， 牛凝血酶的最终浓度为5IU/ml。上述反应液在371：保温2h，对释放出血清的体积进行精 确测定。收缩百分率用下式计算:收缩百分率=(Vs/Vt)X100。这里Vs代表释放出血清 的体积，Vt表示总的反应液体积。
(四） 复钙时间测定
0. lml家兔柠檬酸盐血浆与0. lml样品在37'C水浴中温育5min后，加0. lml 2. 5X 10_2mol/L CaCl2溶液，并记录血浆复钙时间。对照是将样品液改为含0. 15mol/L NaCl的 Tris-HCl 缓冲液(pH7.3)。
(五） 凝血酶时间测定(夏盛强等，1987)
配1%人纤维蛋白原于PH7. 4, 0. lmol/L Tris-HCl缓冲液中。取0. 5m丨于小试管 中，加0. 25ml待测酶液，于37€保温4h。若不凝固，则加入0. 01 %凝血酶溶液0. 2ml，观 察凝血酶的时间延长。溶液不凝固，则推测为具有纤维蛋白原溶解活性。
