蛇毒的脱毒方法有甲醛法、戊二醛法、二氢硫辛酸法、谷胱甘肽法、美蓝法、依地酸法 及7射线照射法等，但以甲醛法较稳定，免疫原性好。以下介绍几种制备蛇毒类毒素常用 的方法。
(一） 渐增量甲醛脱毒法
先用33. 3mol/L磷酸缓冲液将蛇毒(或提纯蛇毒或粗毒)配成1%浓度，再于第1、第 3、第5、第7天分别各加入0. 2%甲醛(V/V)，最后甲醛含量为0. 8%(V/V)，在温箱中脱 毒。10天后，每天取出注射小白鼠作毒性检查，至完全脱毒为止。加0.01%硫柳汞(W/ V)，在4°C冰箱中用50倍的无菌生理盐水透析2天〜3天，经除菌过滤后，做LF、含氮 量、甲醛浓度测定和无菌检査。然后根据含氮量将其稀释至所需浓度（含蛋白3mg/ ml)，再加吸附剂磷酸铝，使呈1.3mg/ml。补足0.01%硫柳汞(W/V)，分装安瓿。经理化 检查和无菌检查合格即为成品，4'C保存待用。
(二） 一次甲醛脱毒法
脱毒用新鲜配制的无菌0. 2%(W/V)甲醛、PBS(66. 7mol/L，pH7. 0),在无菌操 作下配制2mg/ml(W/V)蛇毒溶液(如蝮蛇毒），置37°C脱毒，7天后每天检查脱毒情况， 至完全脱毒为止。加入0. 01%硫柳汞(W/V)，在无菌操作下于4°C低温用50倍以上无菌 生理盐水透析48h,经除菌过滤后，做LF、含氮量、甲醛浓度测定和无菌检查。
吸附剂吸附用磷酸铝吸附使含量为1%〜1. 5%的浓度，加入0. 01%硫柳汞(W/ V),摇匀。在无菌操作下分装、封瓶、标注。抽样作理化性质和无菌检查。也可将l0mg/ml 的蛇毒生理盐水溶液在弱酸或弱碱或中性环境下加入0. 2%甲醛(W/V)进行脱毒，再用 无菌生理盐水稀释至2mg/ml的浓度，用铝盐吸附而制成。检查合格后，即为吸附甲醛蛇 毒类毒素，置4X：冰箱保存待用。
(三） 低温乙醇提纯甲醛脱毒法
用无菌pH7. 0，16. 7mol/L磷酸盐缓冲液将蛇毒(如黄绿珞铁头蛇毒)配成1%浓度， 在一1CTC下加入纯酒精，使最终浓度为30%，置一3CTC中5h后，在一10°C下1 OOOr/min 离心30min，沉淀物再混悬于pH7. 0 PBS中，在混悬液中分4次加入甲醛液，使其最后浓 度为1%。脱毒后，经无菌生理盐水透析，除菌过滤，加入防腐剂，用磷酸铝吸附(1. 35mg/ ml)，使蛋白质最后含量为lmg/ml，经理化、微生物等检定合格即为低温乙醇提纯甲醛脱 毒类毒素。
(四） 戊二醛脱毒法
用25 %戊二醛进行脱毒。在PH7. 0缓冲盐溶液的蛇毒溶液中，加入戊二醛，使其含量 为2. 5Xl(T3mol/L，蛇毒（如眼镜蛇毒）蛋白含量为lmg/ml的浓度，置2(TC18h〜24h (90%以上毒性被脱去），加入赖氨酸终止反应。经除菌过滤后，加入吸附剂吸附，再加入防 腐剂，分装，检定合格后即为吸附戊二醛蛇毒类毒素。
(五） 二氢硫辛酸脱毒法
新鲜配制25mg/ml蛇毒（如黄绿烙铁头蛇毒）生理盐水溶液，以300r/min离心 lOmin，上清液经除菌过滤，无菌试验确定无菌，按50mg/2ml分装于小瓶，冷冻干燥。每瓶 干燥毒加入无菌0. 5%二氢硫辛酸溶液10ml，溶解后置37°C lh脱毒，这时呈pH7. 2的乳 白色溶液。加入防腐剂后，经无菌、安全、理化检定合格即为二氢硫辛酸蛇毒类毒素。也可 加入吸附剂制成吸附二氢硫辛酸蛇毒类毒素。
(六） 7射线照射脱毒法
用100KR的7射线照射圆斑蝰蛇毒,可使其脱毒而保留抗原 性，而成为蛇毒类毒素。
