每年4~10月份为交配期。交配时,雄蛇伏于雌蛇体背部,尾部缠绕雌蛇,伸出交器,将其中1个伸入雌蛇泄殖腔内,射精后,雄蛇尾部下垂,使交接处分开,两蛇仍有一段时间静止不动;以后,雄蛇多先开始爬行,雌蛇恢复活动较晚。蝮蛇的怀卵数为5~40枚,1次交配后精子可在雌蛇体内储用3年。蝮蛇为卵胎生,每年6~9月份产仔,每胎2~17条。初生仔蛇长219~341毫米,平均300毫米。雌蛇产前常不食、不动,性情较凶猛。产仔时,泄殖腔孔前面逐渐膨大,尾部翘起,蛇体收缩蠕动,泄殖腔孔张开,有时排出大量粘液。初生仔蛇包在透明膜内,破膜而出后即仰头挣扎摆动。仔蛇无卵齿,在肛鳞前15~16或16~17腹鳞之间有“脐带”。仔蛇爬行时,脐带被擦落,此时可见脐缝,但很快即消失。不久即进行第一次蜕皮,蜕皮后仔蛇体长可增长10毫米左右。仔蛇的生长速度与活动季节的长短和食物的多少有关,一般经过两年,即达到性成熟。
由于蝮蛇的生命力强,分布广泛,数量很多,有较大的资源町供天然采收,所以,目前对蝮蛇的人工养殖较少。浙江省曾在定海县试行过海岛放养蝮蛇,效果很好。另外,在东北地区有些养蝮蛇取蛇毒的单位,采取春季收捕蝮蛇,集中人工饲养,定时取毒,到秋末,再将蝮蛇放回自然界,由其自己寻找越冬场所,进行冬眠。高度集中饲养,由于过量取蛇毒,加之饲料及人工环境条件都难满足蝮蛇的要求,会使蛇生活力降低,使蝮蛇在越冬前其肥满度达不到越冬要求,造成蝮蛇在越冬期内大量死亡。应通过系统研究,形成一套科学的繁殖保护措施,才能挽救目前蝮蛇数量急剧下降的局面。