此种检测技术是1957年Muelling氏等首先介绍的(Amei. ican Jof Clin ic alpathology,28:489),并成功地应用于蛇伤实验动 物的检定Tret hewie 和 Tliom as 氏等,Toxi con , 7: 243, 1969)。
我国应用此法于临床的有安徽中医学院李云龙教授的天然胶 乳凝集抑制试验等,现将我们应用国家发明三等奖获得者李云龙 氏的方法使用情况介绍于后,他的方法于1986年4月21 ~27日在 南斯拉夫国际博览会上展出及李云龙教授1990年2月在印度瓦腊 纳西召开的第二届亚太地区毒素会议上作了报告,获语国际上的 好评,为国家争碍了荣誉。
笔者应用李氏法,体会很深.曾于1986年在《中华医学杂志》第66卷第10期上发表"天然胶乳凝集抑制试验快速鉴定蛇 伤203例"的论文。毒蛇咬伤的快速诊断,即致伤蛇种快速诊晰 法,亦即天然胶乳凝集抑制试验,是蛇毒的特异性抗原作为诊 断指标,从蛇伤牙痕中吸出少量微带血性的组织液进行检验,5~8 分钟内即可确诊为何种毒蛇咬伤。我们1982-1986年采用此法对7 个蛇种共293例病人进行临床检查,准确率很高,介绍如下。见 表 6-4。
表6-4致伤蛇种快速诊断法诊断蛇伤2%例简况
蛇伤种类 |
病例数 |
咬伤后不同时间检查阳性数 |
阳性率% |
||
12小时内 |
13-24小时 |
24小时liJl上 |
|||
金环蛇 |
47 |
《42/42 |
4/4 |
1/1 |
100 |
銀环蛇 |
39 |
37/37 |
2/2 |
0 |
100 |
眼焼蛇 |
89 |
65化6 |
13/13 |
8/10 |
96.63 |
眼镜王蛇 |
3 |
2/2 |
1/1 |
0 |
100 |
竹叶青蛇 |
84 |
56/56 |
16/16 |
12/12 |
100 |
烙铁头蛇 |
29 |
16/17 1/1 |
6/6 1/1 |
7/7 0 |
96.55 |
且々化 合计 |
Z 293 |
219/221 |
42/43 |
27/29 |
27/29 |
阳性率% |
(99.99) |
(99.99) |
97.67 |
93.1 日 |
98.29 |
173例,5~12小时49例,13~24小时43例,24~72小时27例,8 天1例。取材前伤口已作清创或草药外敷者95例,未作任何处理 者198例。被咬时看清致伤蛇者]21例,未看清者172例。
检查方法
先用生理盐水(忌用规酒、酒精)把伤口皮肤冲洗干净,再 用消毒刀片或注射针头在伤口上牙痕为中屯、)轻轻划痕(以 微出血即可)然后用吸管从伤口上吸取少量微带血性的组织液, 以五倍之生理盐水稀释为检材。
取清洁玻片(5x40cm),用红漆划成8个方格,注明各格诊断 的蛇种名称)一张,将检材滴入各格内,每格1滴(约50ul),再 分别加人金环蛇、银环蛇、眼镜蛇、眼镜王蛇、竹叶青化、烙铁 头蛇、蜡蛇、五步蛇蛇种诊断I液1滴至相应格内,混合摇动1 分钟。各格再加入相应蛇种诊断n液1滴。混合摇动5~8分钟, 观察结果:凝集者为阴性,均匀浑浊为阳性,即为该种蛇所咬伤。 检查结果见上表6-4。
例1、梁某,女,10岁,广西梧州市郊高屁村第7队小学生, 住院号:820079,病床号:51,蛇伤编号:113,眼镜蛇伤号:
患者于1982年9月1日晚上床睡觉时,左手不慎碰中一冰凉 之生物而被咬伤,伤口即出鲜血少许,疼痛,迅速肿胀,于晚上 12时到我院急诊,以眼镜蛇咬伤收入院留医。
入院检查:T36.3t, P102 次/分,R20 次/分,BP17/10kPa。左 手明显肿胀、麻木、疼痛,左中指第一节内侧紫黑色牙痕2个, 牙距8mm,头昏,舌质淡红、f薄黄,脉弦细而数。实验室检查: 血象 RBC4.05xl0i2/L,Hb l115g/L,WBCl4.8xl09/L,分叶 0.8,淋臣
0. 2;血沉14mnyfl寸;尿检查:白血球少许,.上皮细胞少许,其他 阴化生化G、P、T40u。
诊断:眼镜蛇咬伤(风火兼症——轻型)。
治疗经过:人院后(9月2日零时)即针刺排毒,由于医生与 其他人诊断意见不同,家长亦认为是"娱蚁咬伤",故伤口只作一 般处理及用抗生素、抗过敏、激素治疗,症状未见好转,同日下 午2时30分从患孩伤口取出少量微带血性之组织液进行天然胶乳 凝集抑制试验实验,作咬伤的蛇种诊断,6分钟后即显眼镜蛇毒阳 性,其他蛇毒阴性反应,与人陪诊断相符,即改用精制抗眼镜蛇 毒血清5000U静脉滴注,局部用神农蛇药酒湿敷,临床症状很快 消失,至9月3日,肿消尽,痛除,实验室复查各项正常,于9 月4日痊愈出院(共用医疗费10元9角零分)。
例2.冯某,男,20岁,广西梧州市塑料厂工人,住院号: 840077,病床号:54,蛇伤编号:326,金环蛇伤号:59。
患者于1984年11月18 日晩上 7时左右在马路中不慎踩中1 《约1尺长的蛇而被咬,因天漂看不清蛇体,于8时30分来到本 院询问是否被毒蛇咬伤。
检查:T36.6℃P71次/分,R20次/分,BP15 /9.6kPa,左足拇
趾关节背侧牙痕2个,牙距6mm,局部微肿,舌质淡针、苔薄白, 脉弦。局部无任何不适,亦无全身中毒症状,经天然胶乳凝集抑 制试验检查,实验第五分钟时显金环蛇毒阳性反应,其他蛇毒哄 性反应,证明左足趾之痕为金环蛇所咬,故收入院观察。
诊断:金环蛇咬伤(风症——轻型)。
入院后,精制抗金环蛇毒血清皮试阳性,立即肌注异两嗦 50mg, 5分钟后将2支血清加人10%葡萄糖500ml中静脉滴注, 过程顺利,一直没有出现全身中毒症状,用去医巧费9元7角5 分,于次晨出院。
例3、覃某,男,14岁,广西苍梧县旺甫乡龙洞村人.住院 号:850044,病床号:33,蛇伤编号:391,蜡蛇伤号:6。左手
被摧蛇咬伤(火症——重型),于1985年7月10日急诊人院,
当时缺蜡蛇诊断液,为了检查天然胶乳凝集抑制试验的准确性,
恃作试验性检验:结果金环蛇、银环蛇、眼镜蛇、眼镜王蛇、竹
叶青蛇、烙铁头蛇、蜡蛇、五步蛇全部出现阴性厉应。此病例经
静注精制抗蛙蛇毒血清及中西医结合治疗9天,痊愈出院。
例4、陈某,男,50岁,广东德庆县回龙镇大塘乡大塘村人, 住院号:850098,病床号:38,蛇伤编号:467,蜡蛇伤号:7。 左踩被蜡蛇咬伤(火症——重型),于1985年11月1日急诊入 院,用天然胶乳凝集抑制试验检验的目的、结果与例3同,经中 医药治疗8天痊愈出院。
一、 致伤蛇种的诊断,目前主要是根据蛇伤时所见或捕获的 蛇进行确诊。但是,通常患者不懂得毒蛇的识别方法,无从知道 是被哪种蛇咬伤,多数情况,连蛇的样子、影子都未见到,从这 293例来看,与我们进行的蛇伤流行病学调查的结果及国外报道蛇 伤发生的时间、地点相似,多数是在晚间(158例)或山林草地中 发生的,多数(172例)未能见到蛇。因此,只能根据患者局部牙 痕,临床症状和常规化验进行诊断,往往早期不易确诊,会延误 病人的救治。
有一眼镜蛇咬伤患者,由于初期某矿医院认为是"娱峻咬 伤",40小时后才转来我院,延误了治疗时间,致使大快皮肉坏 死,住院长达66天,花去医疗费370.52元。例I初期南于大部分 医务人员认为不是蛇伤,家长亦认为是"娱蚁咬伤",后经天然胶 乳凝集抑制试验确诊为眼镜蛇咬伤,及时采用抗眼镜蛇毒血清及 蛇药治疗,结果3天痊愈出院。前者住院天数是后者的22倍,医 疗费是后者的34倍。
二、 神经毒类蛇伤,如金环蛇、银环蛇、海蛇伤的早期症状 轻微或根本无症状,容易使患者及医者忽视。广西平乐县通过对 蛇伤流行病学的调查,,致死的大部分为金、银环蛇所伤,占死亡 病例的84%,其中有5 k死亡后才明确为银环蛇所伤,这与金、银 环蛇咬伤的临床特点有关,因为金、银环蛇咬伤时,伤口不红不 邮(金环蛇咬伤部分病例也只微肿,也不甚痛),仅有麻木感,不 易引起患者注意,不及时就医,也易使医生忽视。一旦全身症状 出现,病情发展快,迅速恶化,呼吸变慢变浅,口唇、指趾发巧、 眼球固定、瞳孔散大、对光反射消失、全身雍疾、呼吸也跳停止 而死亡。例2早期请不明确是否被毒蛇咬,但经天然胶乳凝集抑 制试验确诊为金环蛇咬伤,及时用药,总共花费不足10元便痊愈 出院。这显示T天然胶乳凝集抑制试验对指导抢救治巧毒蛇咬伤 患者的重要作用。
三、我国目前生产的6种抗蛇毒血清,都是巧价的,诊断不 明就不能使用,因此,天然胶郭凝集抑制试验就成了及时有效地 抢救和治巧蛇伤病人最重要的首要工作。
四、我们共检查7肿蛇伤2%例病人,能确定诊断者为288 例,总阳性率98.巧%,同临床最后诊断完全相符(28的88)。其 中在被蛇咬时见到并能确认蛇种的有121例,除被眼镜蛇、五步 蛇咬伤各1例敷了生草药及另1例8天后作检查全部凝集外, 及另有2例患者同时出现交叉旧性反应,其中1例烙铁头蛇咬伤 (见蛇),巧时出现竹叶青蛇蛇毒的反应,这可能是由于咬后30分 钟即作检查,检材中含蛇毒量高,它和具有一定共同抗原的竹叶 青蛇的抗体发生了部分反应,因而造成了交叉反应。如果延长观 察时间或再将检材作适当稀释后重作检查,看来即可避免,另2 例取材前已作生草药外敷处理的眼镜蛇(见蛇)、五步蛇(见蛇) 咬伤,同时出现眼镜王蛇和竹叶青蛇毒阳性反应,可能由于检材 中含有一定量的药物对效价较低的眼镜王蛇韋及竹叶青蛇靖的抗 体产生了一定的作用,因而出班了非特异性的交叉抑制现象,如 果适当延长观察时间,或许可以避免。其余116例皆同检签一致, 这显巧此试验的特异性强。此293例中,264例是在咬伤24小时 内检奄的,因此刚性率高,而15例弱阳性患者,巧是在检查取材 前局部伤口就已进行蛇药外敷处理(其中13例又是在咬伤24小 时后取柯检查的),因此,取材必须在伤口未经任何破坏蛇毒的药 物处理前进行,才能提高阳性率。
五、当时缺蛙蛇诊断液,例3、例4都是有意进行试验性诊断 的.结果全部阴性反应。另外,1985年9月,我们举办有五个省 (区)参加的蛇伤培训班学习了本法后,于9月20日对刚到院急 诊的竹叶青蛇咬伤的患者(见蛇确诊)进行试验性快速诊晰,结 果学-员30人同时在5~8分钟内得出相同的结果一竹叶青蛇遵阳 性,其化蛇毒全部阴性反应。这充分说明天然胶乳凝集抑制试验 方法简便,一学就会,巧须特殊设备就能在5~8分钟内确诊致伤 的蛇种,费用低,易于推广使用,特异性强,阳性率高,适合基 层和农村推广应用,可作为致伤蛇种的早期快速诊断的常规方法。