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抗血清的交叉中和作用

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   2012-12-27 7560
核心提示:同科不同蛇种或不同亚种蛇毒之间的成分,其抗原在性质上往往有相似的成分,制成的抗毒血清,尽管单价,但能中和不同蛇种的某些成分,称交叉中和作用。交叉反应越强,相似成分越多,从而可供临床上治疗同科蛇种或不同亚种蛇的蛇伤。现将我国制备的抗蛇毒血清的交叉中和实验介绍如下。

        同科不同蛇种或不同亚种蛇毒之间的成分,其抗原在性质上往往有相似的成分,制成的抗毒血清,尽管单价,但能中和不同蛇种的某些成分,称交叉中和作用。交叉反应越强,相似成分越多,从而可供临床上治疗同科蛇种或不同亚种蛇的蛇伤。现将我国制备的抗蛇毒血清的交叉中和实验介绍如下。
    1.抗蝮蛇毒血清对同科不同蛇种的交叉中和实验
    利用琼脂免疫扩散研究,发现该血清与五步蛇毒、竹叶青蛇毒和烙铁头蛇毒均有较强的沉淀线产生,表明四种蛇有相似的成分。而对银环蛇毒和眼镜蛇毒则不产生反应。
用小白鼠做内中和实验,抗蝮蛇毒血清每毫升分别中和竹叶青蛇毒及烙铁头蛇毒各1.5 mg(干毒),中和五步蛇毒l mg,详见表17—1。
表17—1 抗蝮蛇毒血清对不同蛇种的中和实验
 
 
 
 
    从实验结果看,抗蝮蛇毒血清对竹叶青蛇毒和烙铁头蛇毒及五步蛇毒有较强的保护作用,临床上也证实有治疗价值。但从五步蛇毒的中和效价看,要用较大剂量的抗毒血清,效果不太满意。在无五步蛇毒抗血清的情况下可一试。我们用五步蛇毒抗血清做实验,同样的结果,抗五步蛇毒血清对竹叶青蛇毒和烙铁头蛇毒有较强的保护效价,临床也证实该血清可以治疗竹叶青蛇和烙铁头蛇咬伤。因此,当时就没有制造抗竹叶青蛇毒和抗烙铁头蛇毒的单价血清。
    2.抗蝮蛇毒血清对不同亚种的蛇毒交叉中和实验
    (1)新疆蝮蛇。新疆蝮蛇的体形较小,但毒力很强。江浙蝮蛇的毒力为LD10~25ug(腹腔),新疆蝮蛇的毒力为LD55.7~15ug。中科院上海生理研究所用该两种抗蛇毒血清对该两种蛇毒的粗毒和纯化毒(神经毒)做了中和实验分析研究,结果见表17—2。
表17—2 新疆蝮蛇和江浙蝮蛇抗血清交叉中和实验
 
 
 
    表17—2显示的是低水平蛇毒即以保护实验动物50%不死亡的毒力所用的血清量,表明该两种血清对两种蛇毒中和所需抗血清差异不显著。笔者用高水平即高浓度血清(抗血清不稀释)与不同浓度蛇毒做中和实验,江浙蝮蛇抗血清每毫升中和新疆蝮蛇毒1.2 mg干毒,新疆蝮蛇毒免疫的抗血清可中和新疆蝮蛇毒3.2 mg干毒。结果表明,两种蝮蛇毒之间差异较大。中科院生理所实验结果表明,两种蛇毒成分中和所需血清差异不大,说明神经毒两种蛇相似,但江浙蝮蛇抗毒血清中和新疆蝮蛇毒明显低于新疆蝮蛇抗毒血清,只能说明新疆蝮蛇毒神经毒素高于江浙蝮蛇毒。因此,利用新疆蝮蛇毒免疫制造抗毒血清效价不易提高,较难制备满意的抗毒血清。由于新疆蝮蛇咬伤病人少,所以未生产该血清。江浙蝮蛇抗毒血清能中和新疆蝮蛇毒1.2m咖l,在没有新疆蝮蛇抗毒血清情况下,可以利用江浙蝮蛇抗毒血清治疗。
    (2)日本蝮蛇。中国蝮蛇抗毒血清对日本蝮蛇毒具有很强的交叉中和作用,甚至比日本制造同源抗毒血清还强。日本学者Kawnura和Sawai用中国抗蝮蛇毒血清和日本制造的抗蝮蛇毒血清做了中和比较实验,结果见表17—3。我们也做了中和实验,由上海自然博物馆提供的日本蝮蛇毒,其毒力为LD5030.13(腹腔),中国抗血清可中和日本蝮蛇毒14.7mg,ml(血清浓度15%)。得出同样的结果,中国蝮蛇抗毒血清效价高。
表17—3 日本蝮蛇和中国蝮蛇抗毒血清交叉中和作用
 
 
 
 
    ·用0.1 rnl含蛋白浓度为0.25%抗蛇毒血清中和蛇毒致死量;”出血霉量。
    从表17—3的结果看,无论致死毒或出血毒,中国蝮蛇血清的中和蛇毒量远强于日本产血清。因此,日本连年从中国进口中国产抗蝮蛇毒血清。
    (3)中国抗蛇毒血清与美国的响尾蛇同属蝰科蝮亚科,其蛇毒的相似成分如何,尚无有关资料。1989年在桂林召开的国际毒素会议上,认识了美国的A.T.Tu教授,并在上海与杜教授交流了抗蛇毒血清的研制,提供了我国生产的抗蝮蛇和五步蛇两种血清,希望与美国生产的抗响尾蛇血清进行比较研究。后由J.Zurczyk、A.T.Tu作了对比研究。中国产抗血清为液体;美国产抗血清由Wyeth Lab制造,为冻干制品,每支抗血清用10 ml生理盐水溶解。中和试验方法以0.15Ⅱd血清与50恤g不同浓度的蛇毒溶液混合,混合物置37℃环境中孵化0.5 h,然后静脉注射0.2 IIll于小鼠体内,24 h后记录小鼠成活数,效价以l ml血清中和微克蛇毒表示。结果见表17-4和表17—5。    ’ .
表17—4 中国抗蛇毒血清对几种晌尾蛇毒的中和实验
 
 
 
表17—5美国抗蛇毒血清对几种响尾蛇毒的中和实验
 
 
 
    从表17—4和表17—5的实验结果看,中国抗蛇毒血清对北美和南美的响尾蛇蛇毒均有很强的交叉中和作用,表明蛇毒成分有相似部分。特别对南美的矛头蝮蛇毒中和作用比美国产抗血清还强,就是说中国抗蛇毒血清可以治疗矛头蝮蛇的咬伤。对北美的东部菱斑响尾蛇咬伤也有治疗价值。表17—4中矛头蝮蛇毒9 900 txg,换算成效价是l 414 LDso;东部菱斑响尾蛇毒6 767ug,换算成效价应是l 6ll LD∞。表17—4的数据是由原文照译的。
    谈及多价抗蛇毒血清,由交叉中和试验表明,我国的蝮蛇毒抗原性具有广谱性,生产的抗蛇毒血清可与多种蝮亚科蛇毒发生交叉中和作用,可以作为生产多价抗血清的主要抗原。
 
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